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Les techniques de préparation du sperme
utilisées en AMP
(Inséminations - FIV - ICSI)
Le traitement et la sélection des spermatozoïdes se fait
par 2 techniques principales ou la combinaison de ces deux techniques,
selon la qualité de départ du sperme recueilli
1. La technique de migration ascendante ou "
swim up "
Elle est préférentiellement réservée aux
spermes normaux ou peu altérés. Le sperme est mélangé
à un milieu spécifique de lavage et centrifugé.
Après centrifugation les spermatozoïdes ainsi lavés
se retrouvent dans un culot au fond du tube, le surnageant est éliminé,
ensuite un peu de milieu de culture capacitant est déposé
délicatement sur le culot. Après un certain temps les
spermatozoïdes mobiles migrent du culot vers le milieu de cultures
" schéma 1".
2. La technique de centrifugation sur gradient
de densité
Le sperme ou un lavage de sperme est déposé dans un
tube sur un milieu constitué de couches de densités
différentes (2 ou 3 habituellement). Le tube est centrifugé,
en fonction des caractéristiques de centrifugation les différents
constituants du sperme vont se répartir dans les différentes
couches selon leur densité respective. Ainsi les spermatozoïdes
morphologiquement normaux, plus denses, vont migrer dans la couche
la plus profonde. Les autres spermatozoïdes mais aussi les cellules,
les débris et les germes éventuels vont être stoppés
dans les couches supérieures. La phase renfermant les spermatozoïdes
sélectionnés sera lavée avec un milieu de culture
approprié et utilisée pour l'AMP " schéma1
".
Quand la concentration en spermatozoïdes est faible (<500.000
spermatozoïdes/ml) un " simple " lavage peut être
effectué à condition que le sperme
Ne contienne pas beaucoup de débris , leucocytes altérés
, éléments cellulires indésirables
.
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Schéma
1 : Techniques de traitement de sperme
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